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检测尿微量蛋白和Ⅳ型胶原对糖尿病肾病早期诊断的意义

时间:2017-10-08 12:00:08来源:www.xielunwen.net 作者:admin 点击: 60 次
[摘要]目的:探讨尿标本中视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、微量白蛋白(mALB)及Ⅳ型胶原(Ⅳ?C)检测在糖尿病肾病早期诊断中的作用。方法:用ELISA法检测尿中RBP、TRF及Ⅳ?C,免疫比浊法检测尿微量白蛋白(mALB),酶偶联法测定尿肌酐。结果:正常对照组中尿rBP/Cr、TRF/Cr及Ⅳ?C的含量分别为(2.12±0.95)mg/mmol,(1.81±0.52)mg/mmol,(44.68±17.2)ng/ml。在糖尿病
[摘要] 目的:探讨尿标本中视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、微量白蛋白(mALB)及Ⅳ型胶原(Ⅳ?C)检测在糖尿病肾病早期诊断中的作用。方法:用ELISA法检测尿中RBP、TRF及Ⅳ?C,免疫比浊法检测尿微量白蛋白 (mALB),酶偶联法测定尿肌酐。结果:正常对照组中尿 rBP/Cr、TRF/Cr及Ⅳ?C的含量分别为(2.12±0.95) mg/mmol,(1.81± 0.52) mg/mmol,(44.68±17.2) ng/ml。在糖尿病无肾病组中,其mALB的含量与正常对照组相近(P>0.05),而RBP、TRF及 Ⅳ?C的含量与正常对照组相比差异具有显著性(P<0.05)。在糖尿病的初期肾病组和临床肾病组,mALB、RBP/Cr、 tRF/C的及Ⅳ?C的含量均明显高于正常对照组(P<0.01)。结论:联合检测尿RBP、TRF及Ⅳ?C是诊断糖尿病肾病早期损伤灵敏、可靠的实验室指标。

  [关键词] 糖尿病肾病;视黄醇结合蛋白;转铁蛋白;Ⅳ型胶原

  糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)为糖尿病(Diabetes mellitus,DM)的一种严重慢性并发症,在糖尿患者的死亡原因中占有较大比例,故早期诊断对DM的防治和预后具有重要意义。在早期肾活检发现组织学改变时,临床上常无症状,尿常规与肾功能检查均可正常。目前肾病的实验室诊断多以尿微量蛋白、肌酐等作为主要诊断指标,这些指标也难以发现肾脏的早期损害。本资料联合检测尿中视黄醇结合蛋白(R?binding protein,RBP)、转铁蛋白(Transferrin,TRF)等微量蛋白和Ⅳ型胶原(Type Ⅳ collagen,Ⅳ?C),以期早期发现肾脏损害,进而有助于筛选及检出早期DN。

  1 材料与方法

  1.1 研究对象

  1.1.1 正常对照组 50例,为健康体检人群,男28例,女22例,平均年龄(35.2±10.8)岁。

  1.1.2 糖尿病组 按WHO标准诊断:空腹血糖≥7.8 mmol/L或2 h血 糖≥11.1 mmol/L纳入本研究。共50例,其中男性26例,女性24例,平均年龄(54.2±13.5)岁,以上病例均无其他原因引起的泌尿系统病变及近期服用肾毒性药物史。根据DM患者尿微量白蛋白排泄率(Urinaryalbumin excretionrate,UAER)将其分为3组。DM1组:UAER<30 mg/24 h,为无肾病组共15例。DM2组:UAER在30 mm/24 h~300 mg/24 h,为初期肾病组共 17例。DM3组:UAER>300 mg/24 h,为临床肾病组共18例。

  1.2 方法

  1.2.1 尿微量白蛋白(mALB)肌酐测定 免疫比浊法测定mALB,试剂由伊利康生物制品公司提供。同时用Beckman cX7全自动生化分析仪测量尿肌酐,试剂由美国贝克曼公司提供。结果以 mALB/Cr表示,单位为mg/mmol。

  1.2.2 尿RBP、TRF测定 留取除晨尿外的尿液,离心收集上清液,根据磺基水杨酸尿蛋白定量结果进行不同倍数的稀释。采用ELISA法,按福建太阳生物技术公司提供的试剂盒说明书进行测定,结果分别以RBP/Cr、TRF/Cr表示,单位为mg/mmol。

  1.2.3 尿Ⅳ?C测定 由于Ⅳ?C在尿中浓度较低,需对标本进行浓缩。其操作为在离心后的尿液标本中缓慢 依次加入SigmaChemical CO,出品的10 g/L牛γ?球蛋白0.8 ml和5 ml的450 g/L的PEG?4000,在4°C孵育5 min后,于冷冻离心机离心,弃上清液,再用生理盐水充分溶解至1 ml,即得到10倍浓缩尿标本。将浓缩后的尿标本采用ELISA法,按中国科学院上海细胞生物研究所施高生物技术实业有限公司生产的Ⅳ?C测定试剂盒说明书进行测定,单位为ng/ml。

  1.3 数据统计 实验数据以±s表示,以单因素方差分析进行数据处理,部分指标进行相关分析,P<0.05为差异有显著性。

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